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實驗室常用知識,使用Tris緩沖劑的注意事項!

更新時間:2023-11-09   點擊次數(shù):769次

生物緩沖劑在生物化學(xué)研究中有著重要的意義,在免疫印跡、生物芯片及生物雜交等實驗及體外診斷、生物醫(yī)藥等行業(yè)中的應(yīng)用非常多。


生物緩沖劑系統(tǒng)包含幾十個品種。典型品種如Tris、HEPES等。本文將介紹Tris緩沖劑使用注意事項。


注意事項:


1.Tris緩沖液的pH值受溫度影響大,△pKa/℃=-0.031 ,例如:4℃時緩沖液的pH=8.4,則37℃時的pH=7.4,所以一定要在使用溫度下進(jìn)行配制,室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃~4℃。


2.Tris緩沖液對某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用,需使用與Tris溶液具有兼容性的電極;


3.Tris緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大,緩沖液稀釋十倍,pH值的變化大于0.1


4. 吸入,攝入,皮膚吸收Tris可造成傷害,操作時需戴好手套和護(hù)目鏡;


5. Tris緩沖液易吸收空氣中的CO2,配制的緩沖液要注意蓋嚴(yán)密封;


6. Tris在一定程度上與各種分子反應(yīng),包括RNA酶抑制劑,醛,酶,DNA以及常見金屬如Cr3+,F(xiàn)e3+,Ni2+,Co2+和Cu2+等,在有些系統(tǒng)中會起抑制作用,在配制過程中需考慮與其他組分之間的相互作用;


7. Tris緩沖液不適用于BCA測定;


8. 作為蛋白緩沖液時,若后續(xù)工作需要質(zhì)譜,則不適宜用Tris,較好換成其他質(zhì)譜儀可耐受的緩沖液。


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