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大多數(shù)可電離的陽離子脂質(zhì)將不帶電?

更新時間:2022-01-18   點擊次數(shù):1334次

mRNA 是親水的,它可以通過靜電和氫鍵與可電離的陽離子脂質(zhì)相互作用(通常表觀pKa < 6.5)。這取決于 LNP 內(nèi)部的pH值,如果 LNP 外殼對質(zhì)子具有滲透性——這很可能,因為 2-(對甲苯胺基)-6-萘磺酸 (TNS) 和勞氏紫等離子化染料可以進入 LNP 核,那么LNP內(nèi)部的pH值與制劑的其余部分應該相似,約為7 到 8,這意味著大多數(shù)可電離的陽離子脂質(zhì)將不帶電。


然而,由于可電離的陽離子脂質(zhì)堆積在核中,它們可能表現(xiàn)出聚電解質(zhì)行為,導致 Henderson-Hasselbalch 方程的偏差,即滴定曲線的“拖尾"(脂質(zhì)膜內(nèi)的可電離脂質(zhì)的表觀pKa可能與實際值有較大偏差,這意味著pKa為6.5左右的可電離脂質(zhì)在脂質(zhì)膜內(nèi)的表觀pKa可能與理論值有1~2個pKa單位的偏差,所以pKa為6.5左右的可電離脂質(zhì)在pH值為7-8之間的脂膜內(nèi)時,依然有可能絕大部分呈現(xiàn)帶正電的狀態(tài),注:紅色斜體部分是對一些較復雜概念的進一步解讀,后同)。此外,mRNA 和可電離的陽離子脂質(zhì)之間的相互作用可能會影響電離行為。


對于 siRNA,發(fā)現(xiàn)與可電離陽離子脂質(zhì)存在較弱的靜電相互作用,這表明至少對于 siRNA-LNP 制劑,內(nèi)部的pH值接近或等于外部的pH值。對于 mRNA-LNP,尚未進行此類實驗研究。mRNA 和陽離子脂質(zhì)復合的分子動力學模擬研究證明了脂質(zhì)-脂質(zhì)簇和脂質(zhì)-mRNA 簇的形成。靜電力和氫鍵都在驅(qū)動陽離子脂質(zhì)和 mRNA 的相互作用。


Arteta 等人的另一個有趣發(fā)現(xiàn)是他們的mRNA-LNP 的外殼是單層的。其他研究人員根據(jù)冷凍電鏡或 SANS結(jié)果分析提出,mRNA-LNPs 的外殼由一個或多個雙層組成。這些相互矛盾的發(fā)現(xiàn)表明,使用這些技術(shù)評估m(xù)RNA-LNP 殼的性質(zhì)是困難的,可能存在多種類型的mRNA-LNP 結(jié)構(gòu),其結(jié)構(gòu)取決于脂質(zhì)的性質(zhì)和mRNA-LNP 的制備方法。反過來,不同的結(jié)構(gòu)可能會對不同配方的穩(wěn)定性產(chǎn)生影響??傊瑔栴}仍然在于目前我們尚不清楚 mRNA-LNP 的結(jié)構(gòu)以及包封的mRNA 與各種脂質(zhì)成分之間的相互作用。


對各種 mRNA疫苗成分的分析表明,它們具有共同特征,但也存在差異(表 1)。LNP 配方、修飾核苷的使用、高GC含量以及常規(guī) mRNA 和 SAM 疫苗之間的長度差異可能會影響這些 mRNA疫苗在儲存過程中的物理和化學穩(wěn)定性。


核酸遞送類關(guān)鍵輔料可電離化陽離子脂質(zhì)——DLin-MC3-DMA


| 中文名稱:DLin-MC3-DMA

| 商品名:DLin-MC3-DMA

| 化學名稱:4-(N,N-二甲基氨基)丁酸(二亞油基)甲酯

(6Z,9Z,28Z,31Z)-heptatriacont-6,9,28,31-tetraene-19-yl 4-(dimethylamino)butanoate

| 分子式:C43H79NO2

| 生產(chǎn)商/manufacturer艾偉拓(上海)醫(yī)藥科技有限公司/ AVT (Shanghai) Pharmaceutical Tech Co,. Ltd.

| CAS號:1224606-06-7

| 用途:陽離子脂質(zhì)體

| 性狀:無色至淡黃色油狀液體

| 純度:98%

| 溶解性:不溶于水,易溶于DMSO、甲醇、乙醇。

| 分子量:642.09

| 保存條件:-20℃

| 注意事項:避免與強酸、強堿、強氧化性物質(zhì)接觸

| 貨號:002006



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